Verfahren zur Änderung der Spezifität einer Cobalamin-abhängigen 2-Hydroxyisobutryl-CoA-Mutase

Abstract

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur gezielten Änderung der Spezifität von Cobalamin-abhängigen 2-Hydroxyisobutyryl-CoA-Mutasen, die in unterschiedlichen Bakterienstämmen vorkommen, und zur Umsetzung bzw. Isomerisierung verschiedener Acyl-CoA-Substrate Verwendung finden. Gegenstand der Erfindung ist insbesondere die Änderung der Stereospezifität von Wildtyp-Mutasen für die Katalyse von gezielt ausgewählten Acyl-CoA-Substraten zur Herstellung industriell wichtiger Produkte. Basis der Erfindung ist die Herstellung von Kristallen und Aufklärung der Kristallstruktur der bekannten Cobalamin-abhängigen 2-Hydroxyisobutyryl-CoA-Mutase aus dem Bakterienstamm Aquincola tertiaricarbonis L108 unter Verwendung des Hauptsubstrates(S)-3-Hydroxybutyryl-CoA, die die Identifizierung der die Enzymspezifität definierenden Substratbindestellen ermöglichten. Gegenstand der Erfindung sind auch neue Mutase-Mutanten.

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      Publication numberPublication dateAssigneeTitle
      DE-102006017760-A1September 27, 2007Ufz-Umweltforschungszentrum Leipzig-Halle GmbhEnzymatic preparation of 2-hydroxy-2-methylcarboxylic acid comprises producing 3-hydroxycarboxylic acid in aqueous reaction solution, incubating the obtained solution and converting to 2-hydroxy-2-methylcarboxylic acid
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      Title
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